Artículos
INTRODUCCIÓN A LA ESPECTROSCOPÍA
Al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiación se puede estudiar la absorción de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino también en ultravioleta e infrarrojo. Se denomina espectrofotometría a la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda de la radiación, y a las mediciones a una determinada longitud de onda.
La teoría ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de energía llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda está asociada con los fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida de energía.
Transmitancia
La figura muestra un haz de radiación paralela antes y después de que ha pasado a través de una capa de solución que tiene un espesor de b cm y una concentración c de una especie absorbente. Como consecuencia de interacciones entre los fotones y las partículas absorbentes, la potencia del haz es atenuada. La transmitancia T de la solución es entonces la fracción de la radiación incidente transmitida por la solución:
T=I/Io
La transmitancia se expresa a menudo como porcentaje:
%T=(I/Io)*100
Absorbancia
La absorbancia A de una solución se define mediante la ecuación:
A = −log T = log (Io/I)
La mayor parte de los trabajos analíticos se realizan con soluciones de manera que vamos a
desarrollarla relación que existe entre la concentración de la solución y su capacidad de absorber
radiación.
Medición de Transmitancia y Absorbancia
La transmitancia y la absorbancia se miden en un instrumento llamado espectrofotómetro, la solución del analito se debe contener en algún recipiente transparente, tubo o celda.
Como se ve en la representación, ocurre reflexión en las interfases: aire-pared, tanto como en la pared-solución. La atenuación del haz resultante es sustancial. Además, la atenuación de un haz puede ocurrir por dispersión de las moléculas grandes y a veces por absorción de las paredes del recipiente.
Para compensar estos efectos, la potencia del haz transmitido por la solución del analito es comparada comúnmente con la potencia del haz transmitido por una celda idéntica que contiene solamente solvente.
Los espectrofotómetros, están a menudo, equipados con un dispositivo que tiene una escala lineal que se extiende de 0 a 100%. De manera de hacer tal instrumento de lectura directa en porcentaje de
transmitancia, se efectúan dos ajustes preliminares, llamados 0%T y 100%T.
El ajuste del 0%T se lleva a cabo mediante un cierre mecánico del detector.
El ajuste de 100%T se hace con el cierre abierto y el solvente en el camino de la luz.
Normalmente el solvente está contenido en una celda que es casi idéntica a las que contienen las
muestras.
Cuando la celda del solvente es reemplazada por la celda que contiene la muestra, la escala da la
transmitancia porcentual.
Los instrumentos actuales poseen un sistema electrónico que realiza la operación matemática y da la respuesta directamente absorbancia. También hay que hacer una calibración previa con el solvente o blanco.
Curva de Calibración
Denominamos espectro de una sustancia a la representacion de absorbancia (A) en función de longitud de onda (ƒÉ),este grafico presenta ondulaciones con maximos y minimos.
Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de onda correspondiente a un maximo, pues el error de medicion es minimo y la sensibilidad máxima.
Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibración; absorbancia (A) en funcion de concentracion (c), para lo cual se preparan soluciones de la sustancia de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de onda elegida.
Si es válida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relación debe ser una recta,
que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan desviaciones debidas a diversos factores.
(57)+604 4480388